四硫磺酸钠煌绿增菌液需要硫代硫酸钠30g，蒸馏水1000mL

四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)

基础培养基

硫代硫酸钠　30g

蒸馏水　1000mL

碘溶液

碘　6g

碘化钾　5g

蒸馏水　20mL

制法

将基础培养基的各成分加入蒸馏水中，加热溶解，分装每瓶100mL。分装时应随时振摇，使其中的碳酸钙混匀。121℃高压灭菌15min备用。临用时每100mL基础培养基中加入碘溶液2mL、0.1%煌绿溶液1mL。

四硫磺酸钠煌绿(TTB)增菌液

基础液

蛋白胨 10.0g

牛肉膏 5.0g

氯化钠 3.0g

碳酸钙 45.0g

蒸馏水 1000.0ml

除碳酸钙外，将各成分加如蒸馏水中，搅拌混匀，静置约10分钟，加热煮沸至完全溶解，再加入碳酸钙，调至PH7.0±0.1，高压灭菌121℃，20min。

硫代硫酸钠溶液

硫代硫酸钠（含5个结晶水） 50.0g

蒸馏水 加至100.0ml

高压灭菌121℃，20min。

碘溶液

碘片 20.0g

碘化钾 25.0g

蒸馏水 加至100.0ml

将碘化钾充分溶解于少量的蒸馏水中，再投入碘片，振摇玻瓶至碘片完全溶解为止，然后加蒸馏水至规定的总量，储存于棕色瓶内，塞紧瓶盖备用。

0.5% 煌绿水溶液

煌绿 0.5g

蒸馏水 100.0ml

溶解后，存放暗处，不少于1d，使其自然灭菌。

牛胆盐溶液

牛胆盐 10.0g

蒸馏水 100.0ml

加热煮沸至完全溶解，高压灭菌121℃，20min。

制备

基础液 900.0ml

硫代硫酸钠溶液 100.0ml

碘溶液 20.0ml

煌绿水溶液 2.0ml

牛胆盐溶液 50.0ml

临用前，按上列顺序，以无菌操作一次加入基础液中，每加入一种成分，均应摇匀后再加入另一种成分。